木耳中粗蛋白质的测定(凯氏定氮法)
测定原理:利用硫酸和样品一同加热,破坏质、分解出氨,用硼酸吸收,用盐酸标准溶液滴定,从而算出总氮量。分析时只限于测定总氮量,再换算为粗蛋白质量。
所需试剂:4%硼酸吸收液、甲基红－溴甲酚绿混合指示剂、50%氢氧化钠溶液、浓硫酸(化学纯)、硫酸钾(化学纯)、硫酸铜(化学纯)、锌粒(化学纯)、0.1N盐酸标准溶液。
试剂配制:
4%硼酸吸收液:20g硼酸(化学纯)溶解于500ml热水中,加入10ml混合指示剂。
甲基红－溴甲酚绿混合指示剂:5份0.2%溴甲酚绿95%乙醇溶液与1份0.2%甲基红乙醇溶液混合。
测定原理:利用硫酸和样品一同加热,破坏质、分解出氨,用硼酸吸收,用盐酸标准溶液滴定,从而算出总氮量。分析时只限于测定总氮量,再换算为粗蛋白质量。
所需试剂:4%硼酸吸收液、甲基红－溴甲酚绿混合指示剂、50%氢氧化钠溶液、浓硫酸(化学纯)、硫酸钾(化学纯)、硫酸铜(化学纯)、锌粒(化学纯)、0.1N盐酸标准溶液。
试剂配制:
4%硼酸吸收液:20g硼酸(化学纯)溶解于500ml热水中,加入10ml混合指示剂。
甲基红－溴甲酚绿混合指示剂:5份0.2%溴甲酚绿95%乙醇溶液与1份0.2%甲基红乙醇溶液混合。
所需仪器：电子天平，ST-04B凯氏定氮仪 粉碎机
测定方法:
精确称取5.000g样品于凯氏定氮仪配备的消化管中，加热消化至液体清亮后继续加热1h。冷却后,将消化管放入定氮仪蒸馏器中进行蒸馏,其馏液出口管插入盛有25ml硼酸吸收液的锥形瓶中。馏出液用0.1N标准盐酸溶液滴定,滴定至溶液呈中灰色,过量1滴(约0.02ml)溶液呈粉红色。同时作一试剂空白(除不加试样外,其他操作均与上述相同)。
总氮按式(4)计算:
N(V1-V)×0.014
总氮(%)=━━━━━━━━×100…………………………(4)
W
式中:N——盐酸标准溶液的当量浓度；
V1——样液滴定消耗的盐酸标准溶液的量,ml;
V——空白滴定消耗的盐酸标准溶液的量,ml;
W——样品重量,g;
0.014——氮的毫克当量。
粗蛋白质按式(5)换算:
粗蛋白质(%)=总氮(%)×K……………………………………(5)
式中: K——换算系数,等于4.38。
测定方法:
精确称取5.000g样品于凯氏定氮仪配备的消化管中，加热消化至液体清亮后继续加热1h。冷却后,将消化管放入定氮仪蒸馏器中进行蒸馏,其馏液出口管插入盛有25ml硼酸吸收液的锥形瓶中。馏出液用0.1N标准盐酸溶液滴定,滴定至溶液呈中灰色,过量1滴(约0.02ml)溶液呈粉红色。同时作一试剂空白(除不加试样外,其他操作均与上述相同)。
总氮按式(4)计算:
N(V1-V)×0.014
总氮(%)=━━━━━━━━×100…………………………(4)
W
式中:N——盐酸标准溶液的当量浓度；
V1——样液滴定消耗的盐酸标准溶液的量,ml;
V——空白滴定消耗的盐酸标准溶液的量,ml;
W——样品重量,g;
0.014——氮的毫克当量。
粗蛋白质按式(5)换算:
粗蛋白质(%)=总氮(%)×K……………………………………(5)
式中: K——换算系数,等于4.38。
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